产品描述：

       本公司研发的肾类器官分化试剂盒，可高效将人类多能干细胞（hPSCs）诱导分化为肾类器官。其具有足细胞、肾小管等典型结构，并表达SYNPO、WT1、CDH1和LTL等关键标志物。该试剂盒适用于相关机制研究、毒理学研究、药物筛选等。

注：本产品仅供科学研究使用

产品信息：

1.        货号：HJ-CP06004

2.        肾类器官分化试剂盒产品说明

肾器官分化试剂盒使用方法：

1.        ESCs或iPSCs细胞培养至70 %汇合度。

2.        PBS润洗两次后，加入Accutase，于37 ℃培养箱消化3-5 min。

3.        加入等体积mTeSR中止消化，轻轻吹打以解离为单细胞，收集至15 mL离心管中。

4.        1200 RPM 3min离心，弃去上清，加入mTeSR+10 uM Rocki重悬，计数。

5.        Day -2-0以1×10⁴/孔将细胞种于超低黏附96孔板中，mTsER+Rocki补至200 uL/孔体积，培养2天。

6.        分化（12颗类器官）

(1)     Day 0-1弃去上清，加入肾类器官分化培养基 I，200 uL/孔加入培养板，培养1天。

(2)     Day 1-3弃去上清，加入肾类器官分化培养基II，200 uL/孔加入培养板，培养2天，每天换液。

(3)     Day 4-7弃去上清，加入肾类器官分化培养基III，200 uL/孔加入培养板，培养4天，每天换液。

(4)     Day 8-10弃去上清，加入肾类器官分化培养基IV，200 uL/孔加入培养板，培养3天，每天换液。

(5)     Day 11-13弃去上清，加入肾类器官分化培养基V，200 uL/孔加入培养板，培养3天，每天换液。

(6)     Day 14-15用灭菌剪刀将1 mL枪头尖端剪去，用于吸取肾祖细胞球，将球体以2-3个/孔转移至6孔transwell上室中。加入肾类器官维持培养基 I，1.5 mL/孔加入Transwell下室，培养2天，每天换液。

(7)     Day 16-25弃去上清，加入肾类器官维持培养基II ，1.5 mL/孔加入Transwell下室，培养至第25天以形成肾类器官，每天换液。

注意：上述实验过程仅供参考，实际操作时应根据细胞系、环境等具体情况进行调整。染色、组化等下游检测的结果，除受诱导效果影响外，更依赖于细胞系自身特性、抗体灵敏度与特异性、 以及检测方案的优化程度等因素。我司无法对下游检测的结果提供保证，亦不负责处理因此类问题引发的争议。