肾脏类器官周报（20260324）
来源:华津生物微信公众号 | 作者:华津生物 | 发布时间 :2026-03-24 | 0 次浏览: | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ ▶ | 分享到:
本期简报介绍两项肾脏类器官技术新进展。荷兰研究团队比较了多种从水凝胶包埋的肾类器官中提取RNA的方法，确立了“先酶解水凝胶，再使用专用试剂盒”的最优流程。美国团队则建立了人诱导肾单位祖细胞（iNPCs）的长期扩增方案及后续分化为肾单位类器官的详细步骤，提高了类器官的均一性与足细胞成熟度。两项研究推动了肾脏类器官技术的标准化。
肾脏类器官研究简报 | 方法学进展

近期肾脏类器官研究在提取方法优化、疾病模型构建及培养体系改良等领域持续取得进展。本期简报汇总2篇相关研究，主要内容如下：

01
海藻酸盐-降冰片烯水凝胶包埋肾类器官的RNA提取方法比较

文献名称：Comparison of RNA extraction methods from kidney organoids encapsulated in alginate-norbornene

发表期刊：Methods 发表日期：2026年3月16日在线预发表

研究团队：荷兰马斯特里赫特大Carlos Mota团队

研究概要：本研究系统比较了从海藻酸盐-降冰片烯水凝胶包埋的肾类器官中提取RNA的6种方法。结果表明，CTAB法（十六烷基三甲基溴化铵提取法）因RNA得率不足或基因组DNA污染严重，不适用于该体系。相比之下，先以海藻酸裂解酶酶解消化去除水凝胶，再结合Maxwell RSC植物RNA试剂盒提取的方案表现最优，悬浮培养组与包埋组间内参基因Ct值标准差低于0.5，重复性最佳。该研究为类器官-水凝胶平台的分子分析提供了可复现的提取流程。

RNA提取方法比较图
图1. 包埋于水凝胶中的肾脏类器官RNA得率显著低于悬浮培养组，主要源于包埋条件下类器官体积减小与代谢活性降低。在悬浮样本中，TRIzol法的RNA得率高于磁珠法，而在包埋样本中两种方法无显著差异。（点击图片可放大）
02
人诱导肾单位祖细胞的扩增及其向肾单位类器官的分化

文献名称：Expansion of human pluripotent stem cell-induced nephron progenitor cells (iNPCs) and the generation of nephron organoids from iNPCs

发表期刊：Nature Protocols（IF 16） 发表日期：2026年3月刊

研究团队：美国南加州大学Zhongwei Li团队

研究概要：本研究建立了一套从人类多能干细胞诱导、纯化并长期扩增肾单位祖细胞（iNPCs）的方案。通过优化培养基（hNPSR-v2），iNPCs可在常规单层培养中稳定增殖，其转录组更接近原代人肾单位祖细胞。研究进一步描述了从扩增后的iNPCs通过气液界面分步诱导生成肾单位类器官的流程，该方法制备的类器官非目标细胞类型较少，足细胞成熟度更高。整套方案需时1.5-2个月，适用于各类人多能干细胞系。

肾单位祖细胞扩增及类器官分化流程图
图2. 该方案分为四个主要阶段：人多能干细胞解冻与传代、诱导分化为肾单位祖细胞、肾单位祖细胞株的建立、以及从肾单位祖细胞株生成肾单位类器官。各阶段的关键培养基成分分别列出。根据是否含有SIX2报告基因，建立肾单位祖细胞株所需时间有所不同：有报告基因者需5天完成纯化与初步质控，无报告基因者需在hNPSR-v2培养基中连续传代17天。（点击图片可放大）
小结

上述研究从技术方法角度为肾脏类器官领域提供了参考：前者建立了水凝胶包埋类器官的RNA提取优化流程，解决了该培养体系下游分子分析的关键瓶颈；后者建立了肾单位祖细胞的长期扩增体系及类器官分化方案，提高了类器官的细胞组成均一性与足细胞成熟度。两项研究共同为肾脏类器官的技术标准化和应用推广提供了重要基础。